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當前位置：首頁 > 公司新聞 Polysciences是一家化學品制造公司，在國際上享有盛譽。可提供各種生命科學、生物加工、微粒子、醫(yī)療器械、特種化學品和電子化學品等領(lǐng)域的產(chǎn)品和定制解決方案。Polysciences的產(chǎn)品不僅效率高，而且穩(wěn)定可靠，為廣大科研人員提供了堅實的技術(shù)支撐。
Polysciences提供從科研級到GMP級轉(zhuǎn)染試劑，可用于基因轉(zhuǎn)染、蛋白表達和RNA干擾等研究方向。Polysciences科研級轉(zhuǎn)染試劑有兩種分子量，分別是Polyethylenimine, Linear, MW 25000(即PEI 25K)和Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride，MW 40,000(即PEI MAX)。
一、Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的優(yōu)勢
·轉(zhuǎn)染效率高，細胞毒性低；
·蛋白表達量高；
·節(jié)約成本：PEI至少能夠降低40%的轉(zhuǎn)染試劑總成本；
·適用于HEK293等真核細胞的轉(zhuǎn)染；
·適用于貼壁細胞和懸浮細胞的轉(zhuǎn)染；
·適用于有血清和無血清的轉(zhuǎn)染條件；
·無機試劑，無動物源成分；
·產(chǎn)品穩(wěn)定，質(zhì)控嚴格；
·工藝流程適用范圍廣，容易優(yōu)化，適合小規(guī)模培養(yǎng)板、培養(yǎng)瓶到大規(guī)模的生物反應(yīng)器。
二、Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑使用方法
以293T貼壁細胞為例：
1.細胞準備：
使用膠原酶處理細胞并計數(shù)。在6孔板中以每孔2×106細胞接種，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h。24h后，移除之前培養(yǎng)基，每孔加入2mL新鮮的DMEM：F12+5%FBS。
2.轉(zhuǎn)染過程：
(1)檢查細胞匯合度，達到70%-80%時開始轉(zhuǎn)染。
(2)分別用兩份100μL無血清培養(yǎng)基稀釋DNA，使DNA終濃度為1ug/ml（DNA/總培養(yǎng)體積）和適當比例的Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑。DNA:PEI 的比例要依據(jù)自己實驗摸索最適比例。
(3)將稀釋的Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒（總體積 200μL）輕輕混勻，室溫孵育30分鐘。
(4)PEI-DNA復(fù)合物滴加到細胞培養(yǎng)板每個孔中，輕搖混勻。注意輕輕沿著孔板邊緣滴入，不是在細胞的頂部以免破壞細胞的粘附性。
(5)將培養(yǎng)板放入 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)中培養(yǎng)24h。
3.結(jié)果觀察：
在24小時后使用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效果，超過80%的293T細胞在轉(zhuǎn)染后的24h可以觀察到綠色熒光。
三、使用時的注意事項：
1.對于不同的細胞培養(yǎng)條件，需要做出相應(yīng)的優(yōu)化。
2.轉(zhuǎn)染過程中要小心細胞的受損和污染問題。
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